测试室 | watermaze.org

动物对测试室的察觉比我们多：冰箱的嗡嗡声、上一只动物留下的气味、实验者站立位置的变化。这些问题涉及房间本身，以及让它每天保持不变的小习惯。

常见问题

测试室应如何布置？

使用一间只用于测试的安静房间，迷宫放在中间，墙上有充足的固定线索。1) 把追踪电脑和实验者置于帘子或屏风后，让动物看不到。2) 整个研究期间所有物品保持在同一位置。3) 保持室温稳定（通常为20-24 °C）。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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动物依靠房间四周的线索导航，所以试次之间任何移动的东西（人、包、推车）都可能成为误导性线索。用帷幕或隔板遮住实验者[Bromley-Brits 2011]；让电脑处于水池视线之外[HVS]。装在轨道上的天花板帘子可在线索试次中遮住房间[Vorhees & Williams 2024]。订购大型水池前先检查搬运通道[HVS]。

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Morris证明，用帘子把水池围起来后表现降到机会水平，证实了远端房间线索驱动位置学习[Morris 1984]。在ARRIVE第9项下报告设置情况[Percie du Sert 2020]。

来源： Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; Morris (1984). Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat. Journal of Neuroscience Methods 11(1):47-60. doi:10.1016/0165-0270(84)90007-4; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

水迷宫的房间、水池和平台应该如何布置？

摄像头位于水池中心上方，水池几乎占满图像，远端线索放远，照明为漫射光。1) 水池直径约1.8-2 m，约30 cm水深之上再有30 cm池壁。2) 平台恰在水面之下，顶面为水面面积的1/50至1/100。3) 四盏向上照的灯，放得足够低，从水中看不到。4) 追踪电脑放在水池视线之外。

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房间最好是方形或由屏风围起；房间越大，越有利于远端线索。水池支架高度适中，带可锁脚轮（满水的水池可能超过1.5 t，移动会改变校准）；水池应为真正的圆形，内部均匀（黑色或白色以获得对比）。轻轻放入受试对象，使其面向池壁，并在放入时开始试次。HVS建议水温比体温低约13 °C。小鼠常在较小的水池中使用10 cm的平台；在大水池中使用更大的平台（例如约20 cm）。小水池可以浅一些。大型水池要检查搬运通道。

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水池大小、平台大小和水温取决于物种和方案，如不确定请咨询HVS。天花板较低时，适合使用超过1 m的摄像头支架或广角镜头。

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测试室里应注意哪些噪声？

保持房间安静，避免突然的噪声。啮齿动物能听到我们听不到的超声波，所以要修好滴水的水龙头，试次期间不要让吱吱作响的推车进入，并让显示器远离装置。尽量减少人员走动。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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英国指南把滴水的水龙头、推车轮子和电脑显示器列为超声波（高于20 kHz）的来源，并警告要避免突然、不规则的噪声[Home Office]。更好的环境控制能降低变异，从而可能减少所需动物数量[Home Office]。

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超声波探测器有助于找到隐藏的声源。房间一侧的噪声也可能成为方向线索，所以要让房间各侧的声源保持一致，并且每天都相同。

来源： gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

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试次前动物应在测试房间里适应多久？

把动物连同饲养笼一起带进测试室，让它们在开始前安定下来：已发表的方案中至少为30分钟。到达设施后的适应期由兽医或有资质的人员决定。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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水迷宫和旷场方案采用至少30分钟的房间适应时间[Bromley-Brits 2011; Seibenhener & Wooten 2015]。运输后的适应期由国家规定或合格人员确定[Home Office]。ARRIVE要求报告适应情况[Percie du Sert 2020]。

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让每只动物、每一天的适应时间保持一致，并加以记录。我们没有找到关于一天中最佳时段的依据：保持一致并报告即可。

来源： Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

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在两只动物之间应该用什么清洁迷宫或场地？

在两只动物之间清洁，去除尿液、粪便和气味痕迹，并在下一只动物之前让表面完全干燥。乙醇很常用；一些实验室使用次氯酸水，因为它留下的气味更少。整个研究使用同一种清洁剂。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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各方案不同：旷场用95%乙醇[Seibenhener & Wooten 2015]，Barnes台面用10-75%乙醇[Gawel 2019]，或用次氯酸水[Komada 2008]。乙醇蒸气可能影响行为，所以要通风并让其挥发[Gawel 2019]。在水迷宫中，要清除粪便并定期换水[Vorhees & Williams 2024]。

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做法不一：没有一种清洁剂适合所有测试。Barnes台面除了擦拭还要旋转，才能防止气味痕迹被当作线索[Gawel 2019]。易燃溶剂请与安全团队确认。

来源： Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.3791/1088; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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