الحوض والغرفة

غرفة الاختبار

الغرفة الهادئة المتوقَّعة تصنع حيوانات هادئة يمكن تفسير سلوكها.

تلاحظ الحيوانات في غرفة الاختبار أكثر مما نلاحظ: طنين ثلاجة، ورائحة من الحيوان السابق، وتغيّرًا في مكان وقوف المجرِّب. وتتناول هذه الأسئلة الغرفة نفسها والعادات الصغيرة التي تبقيها كما هي من يوم إلى يوم.

أسئلة يطرحها الناس

كيف أجهّز غرفة الاختبار؟

استخدم غرفة هادئة مخصصة للاختبار فقط، والمتاهة في وسطها، مع إشارات ثابتة وفيرة على الجدران. 1) أبقِ حاسوب التتبع والمجرِّب بعيدين عن نظر الحيوان، خلف ستارة أو حاجز. 2) أبقِ كل شيء في المكان نفسه طوال الدراسة. 3) حافظ على حرارة ثابتة للغرفة (عادة 20-24 °C). وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

تتنقل الحيوانات بالإشارات حول الغرفة، لذا فأي شيء يتحرك بين المحاولات (أشخاص، حقائب، عربات) قد يصبح إشارة مضللة. أخفِ المجرِّب بستائر أو حواجز [Bromley-Brits 2011]؛ وأبقِ الحاسوب بعيدًا عن مرأى الحوض [HVS]. وتتيح لك ستائر السقف على مسارات إخفاء الغرفة في المحاولات ذات الإشارة [Vorhees & Williams 2024]. وتحقق من مسارات الوصول قبل طلب حوض كبير [HVS].

التعمق أكثر

أظهر Morris أن إحاطة الحوض بستائر أنزلت الأداء إلى مستوى الصدفة، مما أكد أن إشارات الغرفة البعيدة هي ما يقود تعلّم المكان [Morris 1984]. وأبلغ عن الإعداد تحت البند 9 من ARRIVE [Percie du Sert 2020].

المصادر: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; Morris (1984). Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat. Journal of Neuroscience Methods 11(1):47-60. doi:10.1016/0165-0270(84)90007-4; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

ذو صلة: كم ينبغي أن تهدأ الحيوانات في غرفة الاختبار قبل المحاولة؟ · ما الضوضاء التي يجب أن أنتبه لها في غرفة الاختبار؟

كيف أجهّز الغرفة والحوض والمنصة للمتاهة المائية؟

الكاميرا فوق مركز الحوض، والحوض يملأ الصورة تقريبًا، والإشارات البعيدة بعيدة، والإضاءة منتشرة. 1) حوض بقطر 1.8-2 m تقريبًا، مع 30 cm من الجدار فوق نحو 30 cm من الماء. 2) المنصة تحت السطح مباشرة، وسطحها العلوي 1/50 إلى 1/100 من مساحة الماء. 3) أربعة مصابيح موجهة إلى الأعلى منخفضة بما يكفي كي لا تُرى من الماء. 4) حاسوب التتبع بعيد عن مرأى الحوض.

مزيد من التفاصيل

يُفضَّل أن تكون الغرفة مربعة أو محاطة بحواجز؛ والغرف الأكبر تساعد في الإشارات البعيدة. ويكون حامل الحوض على ارتفاع مريح وبعجلات قابلة للقفل (فالحوض الممتلئ قد يتجاوز 1.5 t، والحركة تغيّر المعايرة)؛ والحوض دائري تمامًا بداخل متجانس (أسود أو أبيض للتباين). ضع الكائنات برفق مواجهةً لجدار الحوض وابدأ المحاولة لحظة دخولها. وينصح HVS بماء أبرد من حرارة الجسم بنحو 13 °C. وكثيرًا ما تُستخدم منصة 10 cm للفئران في حوض أصغر؛ وفي الحوض الكبير استخدم منصة أكبر (مثل 20 cm تقريبًا). ويمكن أن تكون الأحواض الصغيرة أقل عمقًا. وتحقق من مسارات الوصول للأحواض الكبيرة.

التعمق أكثر

يعتمد حجم الحوض وحجم المنصة وحرارة الماء على النوع والبروتوكول، فاسأل HVS إن لم تكن متأكدًا. وتناسب حوامل الكاميرا التي تتجاوز 1 m أو العدسات الواسعة الزاوية الأسقفَ المنخفضة.

ذو صلة: ما العمق المناسب للحوض والماء؟

ما الضوضاء التي يجب أن أنتبه لها في غرفة الاختبار؟

أبقِ الغرفة هادئة وتجنب الضوضاء المفاجئة. فالقوارض تسمع الموجات فوق الصوتية التي لا نسمعها، لذا أصلح الصنابير التي تقطر، وأبعد العربات التي تصرّ أثناء المحاولات، وأبعد الشاشات عن الجهاز. وقلل حركة الناس إلى أدنى حد. وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

تذكر الإرشادات البريطانية الصنابير التي تقطر وعجلات العربات وشاشات الحاسوب مصادرَ للموجات فوق الصوتية (فوق 20 kHz)، وتحذّر من الضوضاء المفاجئة غير المنتظمة [Home Office]. وضبط البيئة بشكل أفضل يقلل التباين، مما قد يقلل عدد الحيوانات اللازمة [Home Office].

التعمق أكثر

يساعدك كاشف الموجات فوق الصوتية في العثور على المصادر الخفية. وقد تعمل ضوضاء في جانب من الغرفة إشارةً اتجاهية أيضًا، لذا أبقِ مصادر الصوت متماثلة في كل جوانب الغرفة ومن يوم إلى يوم.

المصادر: gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

ذو صلة: كيف أجهّز غرفة الاختبار؟ · كم ينبغي أن تهدأ الحيوانات في غرفة الاختبار قبل المحاولة؟

كم ينبغي أن تهدأ الحيوانات في غرفة الاختبار قبل المحاولة؟

أحضر الحيوانات إلى غرفة الاختبار في أقفاصها المنزلية واتركها تستقر قبل أن تبدأ: 30 دقيقة على الأقل في البروتوكولات المنشورة. ويحدد طبيبك البيطري أو شخص مؤهل فترة التأقلم بعد الوصول إلى المنشأة. وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

تستخدم بروتوكولات المتاهة المائية والحقل المفتوح 30 دقيقة على الأقل للتأقلم مع الغرفة [Bromley-Brits 2011; Seibenhener & Wooten 2015]. ويُحدَّد التأقلم بعد النقل بالقواعد الوطنية أو بشخص مختص [Home Office]. وتطلب ARRIVE الإبلاغ عن التأقلم [Percie du Sert 2020].

التعمق أكثر

اجعل وقت الاستقرار نفسه لكل حيوان وكل يوم، وسجّله. ولم نجد مصدرًا يحدد أفضل وقت من اليوم: حافظ على ثباته وأبلغ عنه.

المصادر: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

ذو صلة: كيف أجهّز غرفة الاختبار؟ · ما الضوضاء التي يجب أن أنتبه لها في غرفة الاختبار؟

بماذا أنظّف المتاهة أو الساحة بين الحيوانات؟

نظّف بين الحيوانات لإزالة البول والفضلات وآثار الرائحة، ودع السطح يجف تمامًا قبل الحيوان التالي. والإيثانول شائع؛ وتستخدم بعض المختبرات الماء تحت الكلوري لأنه يترك رائحة أقل. واستخدم المنظّف نفسه طوال الدراسة. وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

تختلف البروتوكولات: إيثانول 95% للحقل المفتوح [Seibenhener & Wooten 2015]، وإيثانول 10-75% على طاولات بارنز [Gawel 2019]، أو الماء تحت الكلوري [Komada 2008]. وقد يؤثر بخار الإيثانول في السلوك، فهوِّ الغرفة ودعه يتبخر [Gawel 2019]. وفي المتاهة المائية أزل الفضلات وغيّر الماء بانتظام [Vorhees & Williams 2024].

التعمق أكثر

الممارسات متباينة: لا منظّف هو الأفضل لكل الاختبارات. وتدوير طاولة بارنز إلى جانب مسحها يمنع استخدام آثار الرائحة إشاراتٍ [Gawel 2019]. وراجع المذيبات القابلة للاشتعال مع فريق السلامة لديك.

المصادر: Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents، methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.3791/1088; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

ذو صلة: كم ينبغي أن تهدأ الحيوانات في غرفة الاختبار قبل المحاولة؟ · كيف أجهّز غرفة الاختبار؟

ما ظروف المختبر التي يجب أن أسجلها وأبلغ عنها؟

سجّل وأبلغ عن كل ظرف قد يؤثر في السلوك: حرارة الغرفة والماء، ومستوى الضوء (lux) ونوع مصدره، ووقت اليوم، ومن أجرى الاختبار على الحيوانات، وأي أحداث غير معتادة. وتدخل هذه في قسم الطرق. وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

تطلب ARRIVE 2.0 متى وأين وكم مرة أُجريت الإجراءات، والتأقلم، والتوزيع العشوائي، والتعمية، ونقاط النهاية الرحيمة [Percie du Sert 2020]. وسجّل حرارة الماء يوميًا [Vorhees & Williams 2024]. وأبلغ عن نوع مصدر الضوء إلى جانب lux، لأن lux مرجَّح للرؤية البشرية [Peirson 2018].

التعمق أكثر

لا يُبلَغ عن التوزيع العشوائي إلا في نحو 30-40% من الأوراق، وعن التعمية في نحو 20% [Percie du Sert 2020]، لذا فالإبلاغ عنهما بوضوح يقوّي عملك.

المصادر: doi:10.1371/journal.pbio.3000410; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007

ذو صلة: كيف أجهّز غرفة الاختبار؟ · ما الضوضاء التي يجب أن أنتبه لها في غرفة الاختبار؟

كيف يرى الموظفون ما يكفي للعمل دون إزعاج الحيوانات أو التتبع؟

استخدم مصباح مكتب مظللًا عند الحاسوب المحجوب، موجهًا بعيدًا عن المتاهة، وتجنب التغيرات المفاجئة في مستويات الضوء. وتظل لجنة الأخلاقيات المحلية وشروط الترخيص والطبيب البيطري أصحاب الأولوية دائمًا.

مزيد من التفاصيل

استخدم إضاءة عمل خافتة غير مباشرة موضوعة بحيث لا تسقط على الحوض ولا تظهر في صورة الكاميرا. وينبغي أن تكون الإضاءة كافية وخالية من الوهج، مع تجنب الفروق الكبيرة في شدة الإضاءة [HSE HSG38; HSE lighting]. ويتيح لك المصباح القابل للتعتيم ضبط أدنى قدر لازم من الضوء.

التعمق أكثر

ممارستنا المقترحة: تحقق من أن المصباح لا يظهر في صورة الكاميرا.

المصادر: hse.gov.uk/pubns/books/hsg38.htm; hse.gov.uk/humanfactors/topics/lighting.htm

ذو صلة: كيف أجهّز المتاهة لتجنب إجهاد الظهر؟ · كيف أتجنب الإجهاد في أيام الاختبار الطويلة؟

للاطلاع على الإعداد كله في مكان واحد، راجع أجهزة متاهة موريس المائية (MWM).

هل لاحظت خطأً، أو تعرف مصدرًا أفضل؟ أخبرنا وسنصححه ونذكر ذلك في صفحة التصحيحات.