水池与房间

水池房间的照明

房间的照明是为动物和摄像机准备的,而不是为你。

照明同时影响两类“观众”。动物需要看到房间四周的线索,摄像机需要一个均匀、水面上没有亮斑反射的画面。原编者的笔记在这方面有明确建议:白色水池用两根带漫射罩的荧光灯管;黑色水池用四盏约60瓦的上照灯,固定得足够高(例如离地6英尺),让摄像机看不到它们。笔记全文见编者笔记页面。

常见问题

测试房间应该多亮?

没有唯一正确的亮度。为你的测试选定一个,用照度计在动物所在高度测量,每天保持一致,并在报告中注明。旷场方案常用强光(500-1000勒克斯);水迷宫房间通常是中等亮度。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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已发表的数值约在25至1000 lux之间。例如:小鼠高架十字迷宫约100 lux [Komada 2008];小鼠旷场500-1000 lux [Seibenhener & Wooten 2015];强光作为巴恩斯迷宫的厌恶刺激 [Gawel 2019]。英国指南指出白化大鼠会回避超过25 lux的环境 [Home Office]。lux是按人类视觉加权的,所以也要记录灯的类型 [Peirson 2018]。

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证据不一。光照会增加焦虑样行为,白化动物对光更敏感 [Peirson 2018],所以不同批次间的光照变化可能看起来像处理效应。

来源: doi:10.3791/1088; Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007

相关: 白化动物受照明的影响是否不同?

如何防止水面反光和眩光破坏追踪?

通过间接照明水池来消除反光。1) 使用上照灯,或让光线从天花板或墙面反射,而不是用灯直接照向水面。2) 查看摄像机画面:水面上不应有白斑。3) 检查整个水池的光线是否均匀。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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水就像一面镜子,所以摄像机视野内的灯会显示为亮斑,追踪器可能把它误认为动物。HVS建议光线充足、无镜面反射、照度均匀,通常使用低矮的上照灯,尤其是水迷宫 [HVS]。尽量减少反射的均匀照明是推荐参数 [Vorhees & Williams 2024]。

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用照度计在中心和靠近池壁的四个点检查均匀度,并记录平均值和最低值:HSE出于同样原因使用平均值和最小值 [HSE HSG38]。深色水池比白色的水更容易显出反光。

来源: doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; hse.gov.uk/pubns/books/hsg38.htm

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追踪时应该用什么照明,尤其是在水迷宫中?

使用均匀、漫射、无反光的光线,通常是在水池周围放四盏矮的上照灯。1) 把上照灯均匀地放在迷宫周围,低到从水面上看不见。2) 让光照向天花板反射,而不是照在水面上。3) 调整阈值之前,运行Check Lighting,消除阴影和眩光。

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良好的照明需要光线充足、没有镜面反射,并且整个表面照度均匀。最常用的方法是使用白炽灯泡的矮上照灯,这在水迷宫中最为重要。从合适距离照向天花板再反射下来的光效果很好;离天花板太近的上照灯会成为直射光源,在水面上造成反光。对于巴恩斯迷宫和旷场,目标是让台面或地面在屏幕上接近白色,没有阴影或眩光。

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支持案例建议把四盏矮上照灯均匀地放在追踪区域外约2 m处;如果光线向下溢出,就把它们放在追踪表面以下。在顶灯管下加纸板挡光板也是一种办法。在Check Lighting中,黑/白点表示阴影,红点表示眩光;在调整阈值之前,保持阈值为100,先消除阴影,再消除眩光。整个实验期间保持照明不变。在反转光周期下,设置之前要先打开追踪灯,否则摄像机画面会是黑的。

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白化动物受照明的影响是否不同?

是的。白化动物对光更敏感,视力也较差,所以要保持适中而恒定的照明。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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白化小鼠对光更敏感,视觉功能受损 [Peirson 2018];白化大鼠回避超过25 lux的环境 [Home Office],视敏度较低 [Prusky 2002]。

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比较白化组和有色组时要小心:差异可能来自视觉。

来源: doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1016/s0166-4328(02)00126-2

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