수조와 실험실

검사실

차분하고 예측 가능한 방이 차분하고 해석 가능한 동물을 만듭니다.

동물은 우리보다 검사실을 더 많이 알아챕니다. 냉장고의 웅웅거림, 앞선 동물의 냄새, 실험자가 서는 위치의 변화까지요. 이 질문들은 방 자체와, 방을 날마다 똑같이 유지해 주는 작은 습관들을 다룹니다.

자주 묻는 질문

검사실은 어떻게 꾸며야 하나요?

검사 전용으로 쓰는 조용한 방을 쓰고, 미로는 가운데에 두며 벽에는 고정된 단서를 충분히 두세요. 1) 추적 PC와 실험자는 커튼이나 칸막이 뒤에 두어 동물의 시야 밖에 있게 하세요. 2) 연구 내내 모든 것을 같은 자리에 두세요. 3) 방의 온도를 일정하게 유지하세요(보통 20-24 °C). 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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동물은 방 주변의 단서로 길을 찾으므로, 시행 사이에 움직이는 것(사람, 가방, 카트)은 무엇이든 잘못된 단서가 될 수 있습니다. 실험자는 휘장이나 칸막이로 가리고 [Bromley-Brits 2011], PC는 수조에서 보이지 않게 두세요 [HVS]. 레일에 단 천장 커튼으로 단서 시행 때 방을 가릴 수 있습니다 [Vorhees & Williams 2024]. 큰 수조를 주문하기 전에 반입 경로를 확인하세요 [HVS].

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Morris는 수조를 커튼으로 둘러싸자 수행이 우연 수준으로 떨어진다는 것을 보여, 원거리 방 단서가 장소 학습을 이끈다는 것을 확인했습니다 [Morris 1984]. 설치는 ARRIVE 항목 9에 따라 보고하세요 [Percie du Sert 2020].

출처: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; Morris (1984). Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat. Journal of Neuroscience Methods 11(1):47-60. doi:10.1016/0165-0270(84)90007-4; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

관련: 시행 전에 동물은 시험실에서 얼마나 안정해야 하나요? · 검사실에서는 어떤 소음을 조심해야 하나요?

수중 미로를 위해 방, 수조, 플랫폼은 어떻게 설정해야 하나요?

카메라는 수조 중앙 위, 수조는 이미지를 거의 채우고, 원거리 단서는 멀리, 조명은 확산광으로. 1) 수조 지름 약 1.8-2 m, 물 약 30 cm 위로 벽 30 cm. 2) 플랫폼은 수면 바로 아래, 윗면은 수면 면적의 1/50에서 1/100. 3) 물에서 보이지 않을 만큼 낮게 둔 업라이트 4개. 4) 추적 PC는 수조에서 보이지 않게.

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방은 정사각형이거나 칸막이로 둘러싸인 것이 이상적이며, 방이 클수록 원거리 단서에 유리합니다. 수조 받침대는 잠금 바퀴가 달린 편한 높이로 하세요(가득 찬 수조는 1.5 t를 넘을 수 있고, 움직이면 보정이 바뀝니다). 수조는 진짜 원형이고 내부가 균일해야 합니다(대비를 위해 검은색 또는 흰색). 피험체는 수조 벽을 바라보게 살며시 넣고, 들어가는 순간 시행을 시작하세요. HVS는 체온보다 약 13 °C 낮은 물을 권합니다. 생쥐는 흔히 작은 수조에서 10 cm 플랫폼을 씁니다. 큰 수조에서는 더 큰 플랫폼(예: 약 20 cm)을 쓰세요. 작은 수조는 더 얕아도 됩니다. 큰 수조는 반입 경로를 확인하세요.

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수조 크기, 플랫폼 크기, 물 온도는 종과 프로토콜에 따라 다르니, 확실하지 않으면 HVS에 문의하세요. 천장이 낮으면 1 m가 넘는 카메라 거치대나 광각 렌즈가 알맞습니다.

관련: 수조와 물의 깊이는 얼마나 되어야 하나요?

검사실에서는 어떤 소음을 조심해야 하나요?

방을 조용히 유지하고 갑작스러운 소음을 피하세요. 설치류는 우리가 듣지 못하는 초음파를 들으므로, 물이 새는 수도꼭지를 고치고, 삐걱거리는 카트는 시행 중에 들이지 말고, 모니터는 장치에서 멀리 두세요. 사람의 출입은 최소로 하세요. 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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영국 지침은 물이 새는 수도꼭지, 카트 바퀴, 컴퓨터 모니터를 초음파(20 kHz 이상)의 원천으로 꼽으며, 갑작스럽고 불규칙한 소음을 경고합니다 [Home Office]. 환경을 더 잘 통제하면 변동성이 줄어 필요한 동물 수를 줄일 수 있습니다 [Home Office].

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초음파 탐지기는 숨은 원천을 찾는 데 도움이 됩니다. 방 한쪽의 소음은 방향 단서가 될 수도 있으니, 소리 원천을 방의 모든 쪽에서, 그리고 날마다 똑같이 유지하세요.

출처: gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

관련: 검사실은 어떻게 꾸며야 하나요? · 시행 전에 동물은 시험실에서 얼마나 안정해야 하나요?

시행 전에 동물은 시험실에서 얼마나 안정해야 하나요?

동물을 홈 케이지째 시험실로 옮겨 오고, 시작하기 전에 안정할 시간을 주세요. 발표된 프로토콜에서는 최소 30분입니다. 시설 도착 후의 순화 기간은 수의사나 자격 있는 사람이 정합니다. 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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수중 미로와 오픈 필드 프로토콜은 최소 30분의 방 순응 시간을 둡니다 [Bromley-Brits 2011; Seibenhener & Wooten 2015]. 운송 후 순화 기간은 국가 규정이나 자격 있는 사람이 정합니다 [Home Office]. ARRIVE는 순화를 보고하도록 요구합니다 [Percie du Sert 2020].

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안정 시간은 모든 동물과 모든 날에 같게 하고 기록하세요. 하루 중 가장 좋은 시간에 대한 근거는 찾지 못했습니다. 일정하게 유지하고 보고하세요.

출처: Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1371/journal.pbio.3000410

관련: 검사실은 어떻게 꾸며야 하나요? · 검사실에서는 어떤 소음을 조심해야 하나요?

동물 사이에 미로나 경기장은 무엇으로 청소해야 하나요?

동물 사이에는 소변, 배설물, 냄새 흔적을 없애도록 청소하고, 다음 동물 전에 표면을 완전히 말리세요. 에탄올이 흔하며, 냄새가 덜 남는다는 이유로 차아염소산수를 쓰는 실험실도 있습니다. 연구 내내 같은 세정제를 쓰세요. 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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프로토콜은 다양합니다. 오픈 필드에는 95% 에탄올 [Seibenhener & Wooten 2015], 반스 테이블에는 10-75% 에탄올 [Gawel 2019], 또는 차아염소산수 [Komada 2008]. 에탄올 증기는 행동에 영향을 줄 수 있으니 환기하고 증발시키세요 [Gawel 2019]. 수중 미로에서는 배설물을 건져 내고 물을 정기적으로 갈아 주세요 [Vorhees & Williams 2024].

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관행은 제각각입니다. 모든 검사에 가장 좋은 세정제는 없습니다. 반스 테이블은 닦을 뿐 아니라 회전시켜야 냄새 흔적이 단서로 쓰이지 않습니다 [Gawel 2019]. 인화성 용매는 안전 담당 팀과 확인하세요.

출처: Seibenhener & Wooten (2015). Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. Journal of Visualized Experiments (96). doi:10.3791/52434; Gawel et al. (2019). Assessment of spatial learning and memory in the Barnes maze task in rodents, methodological consideration. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 392(1):1-18. doi:10.1007/s00210-018-1589-y; doi:10.3791/1088; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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어떤 실험실 조건을 기록하고 보고해야 하나요?

행동에 영향을 줄 수 있는 모든 조건을 기록하고 보고하세요. 방과 물의 온도, 조도(lux)와 광원 종류, 시간대, 누가 동물을 다뤘는지, 그리고 특이한 사건. 이것들은 방법 부분에 들어갑니다. 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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ARRIVE 2.0은 절차를 언제, 어디서, 얼마나 자주 했는지, 순화, 무작위 배정, 눈가림, 인도적 종료 시점을 요구합니다 [Percie du Sert 2020]. 물 온도는 매일 기록하세요 [Vorhees & Williams 2024]. lux는 사람의 시각에 맞춰 가중된 값이므로, lux와 함께 광원 종류도 보고하세요 [Peirson 2018].

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무작위 배정은 논문의 약 30-40%에서만, 눈가림은 약 20%에서만 보고되므로 [Percie du Sert 2020], 이를 분명히 보고하면 연구가 더 탄탄해집니다.

출처: doi:10.1371/journal.pbio.3000410; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; doi:10.1016/j.jneumeth.2017.04.007

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직원이 동물이나 추적을 방해하지 않고 작업할 수 있도록 보려면 어떻게 하나요?

칸막이 뒤의 PC에는 갓이 있는 책상 스탠드를 미로 반대쪽으로 향하게 쓰고, 조명 밝기의 급격한 변화를 피하세요. 지역 윤리위원회, 허가 조건, 수의사의 지시가 언제나 우선합니다.

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수조를 비추지도 않고 카메라 이미지에 보이지도 않도록 어둡고 간접적인 작업 조명을 두세요. 조명은 충분하고 눈부심이 없어야 하며, 조도 차이가 크지 않아야 합니다 [HSE HSG38; HSE lighting]. 밝기 조절 램프를 쓰면 필요한 최소한의 빛으로 맞출 수 있습니다.

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권장하는 방법: 램프가 카메라 이미지에 보이지 않는지 확인하세요.

출처: hse.gov.uk/pubns/books/hsg38.htm; hse.gov.uk/humanfactors/topics/lighting.htm

관련: 허리 부담을 피하려면 미로를 어떻게 설치하나요? · 긴 시험 날에 몸의 부담을 어떻게 피하나요?

전체 설치를 한곳에서 보려면 모리스 수중 미로(MWM) 장치를 참고하세요.

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