小鼠与大鼠

抓取、福利与压力

平静的动物是更好的受试对象,也更快乐。

压力是水迷宫的内在组成部分:正是它让动物想要逃离。但压力过大,动物就会停止学习,或者放弃尝试。良好的抓取方式能带来不同。

常见问题

应该如何抓取大鼠并让它们习惯化?

测试前应轻柔地抓取大鼠几天,让它们在你面前保持平静。挠痒(每天约15秒,持续3天)可以帮助它们放松。如果大鼠躲避你的手,就停下来。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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每只大鼠每天约15秒,持续3天;出现回避、防御姿势或22 kHz叫声时停止 [NC3Rs]。挠痒能引发积极情绪并减少对人的恐惧 [Cloutier 2018]。

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让动物习惯被抓取能减轻压力 [Home Office]。

来源: nc3rs.org.uk/3rs-resources/rat-tickling; doi:10.3791/57190; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards

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压力如何影响迷宫结果?

压力会让动物学得更差、贴着池壁或游得更慢,看起来像记忆问题,其实并不是。对每只动物都保持相同的抓取方式、温度、光照、噪声和时间安排。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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水迷宫训练比巴恩斯迷宫更能升高皮质酮,而且皮质酮升高时学习成绩下降 [Harrison 2009]。受压动物表现更差,所以要保持温度、光照和噪声恒定 [Bromley-Brits 2011]。趋触性反映焦虑 [Prut & Belzung 2003]。

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如果各组之间的压力可能不同(例如改变焦虑的药物),也可以考虑使用陆地迷宫 [Harrison 2009; Patil 2009]。

来源: Harrison et al. (2009). Endogenous anxiety and stress responses in water maze and Barnes maze spatial memory tasks. Behavioural Brain Research 198(1):247-251. doi:10.1016/j.bbr.2008.10.015; Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; Prut & Belzung (2003). The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. European Journal of Pharmacology 463(1-3):3-33. doi:10.1016/s0014-2999(03)01272-x; Patil et al. (2009). Evaluation of spatial memory of C57BL/6J and CD1 mice in the Barnes maze, the Multiple T-maze and in the Morris water maze. Behavioural Brain Research 198(1):58-68. doi:10.1016/j.bbr.2008.10.029

相关: 如何减轻动物的压力? · 品系在焦虑和活动性上的差异如何影响结果?

实验者会影响结果吗?

会的。由谁抓取、怎样抓取,都可能改变行为。使用同一个人(或在各组之间平衡人员),记录每只动物由谁操作,并尽可能让操作者不知道分组。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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啮齿类动物对男性实验者及其气味表现出应激反应 [Sorge 2014]。实验者效应是水迷宫的重要因素 [Vorhees & Williams 2024]。实验室环境会影响行为 [Chesler 2002; Crabbe 1999]。

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之所以避免辅助逃生,部分原因是没有两个实验者会以相同方式引导动物 [Vorhees & Williams 2024]。

来源: doi:10.1038/nmeth.2935; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151; doi:10.1038/nn1102-1101; doi:10.1126/science.284.5420.1670

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如何减轻动物的压力?

减轻压力主要靠温和的抓取和平静、固定的日常安排。温和地抓取(小鼠用隧道或手掌捧起;大鼠用挠痒),让动物习惯化,保持房间安静且条件不变,把水温保持在批准的温度,游泳后把动物擦干并保暖。当地伦理委员会、许可条件和兽医的意见始终优先。

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通过温和、非厌恶性的抓取(小鼠用隧道或手掌捧起,大鼠用挠痒)、习惯化、恒定的房间条件,以及游泳后让动物保持温暖干燥,可以减轻压力。证据:非厌恶性抓取 [Gouveia & Hurst 2017; NC3Rs];恒定条件 [Bromley-Brits 2011; Home Office];温度与擦干 [Iivonen 2003; Vorhees & Williams 2024]。

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优化与好的科学是一致的:降低变异性可以减少动物使用数量 [Home Office]。

来源: doi:10.1038/srep44999; nc3rs.org.uk/3rs-resource-library/mouse-handling; Bromley-Brits et al. (2011). Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice. Journal of Visualized Experiments (53). doi:10.3791/2920; gov.uk/government/publications/care-and-accommodation-of-animals-in-science-advisory-standards; doi:10.1016/s0166-4328(02)00369-8; doi:10.1016/j.crtox.2024.100151

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